Прямая проба Кумбса . С помощью этой пробы доказывают наличие фиксированных эритроцитами ребенка блокирующих антител. Положительная прямая проба свидетельствует о сенсибилизации и служит убедительным признаком гемолитической болезни новорожденного еще до появления других клинических признаков. Как исключение и только в очень тяжелых случаях прямая проба Кумбса может оказаться отрицательной в связи с уже наступившим, почти полным гемолизом сенсибилизированных эритроцитов.
Прямая проба Кумбса выполняется следующим образом: 5 капель крови, взятой из пятки ребенка, помещают в пробирку и добавляют 5 мл физиологического раствора. Хорошо размешивают и центрифигуриуют в течение 10 мин. Отделяют прозрачную жидкость над осадком эритроцитов. Затем снова добавляют 5 мл физиологического раствора, смешивают и центрифигурируют. После трехкратного смешивания с физиологическим раствором эритроциты хорошо промыты. После последнего отделения надосадочной жидкости эритроцитный осадок в количестве 0,1 мл смешивают с 0,9 мл физиологического раствора. Наносят 2-3 капли этой смеси на предметное стекло и добавляют одну каплю сыворотки Кумбса. Наличие агглютинации указывает на то, что реакция положительна, (положительная прямая проба Кумбса). Исследование следует проводить при комнатной температуре выше 16°, чтобы избежать действия Холодовых агглютининов.
Непрямая проба Кумбса служит доказательством наличия свободных антител в сыворотке матери и выполняется с сывороткой крови матери.
Гемолитическая болезнь у новорожденного при Rh-несовместимости проявляется обыкновенно после второй беременности. Первый ребенок рождается здоровым, второй с признаками слабо выраженной анемии и только после третьей беременности рождаются дети с явными признаками гемолитической болезни. Только у предварительно сенсибилизированных женщин еще при первой беременности может родиться ребенок с симптомами гемолитической болезни. В некоторых случаях иммунизация вызывает аборты и рождение мертвых детей. Для начала и тяжести заболевания имеют значение состояние плаценты и продолжительность воздействия материнских агглютининов на плод. При появлении агглютининов за 10-14 недель до родов у ребенка обычно наблюдаются субклинические формы. Раннее появление агглютининов, за 15-26 недель до родов, вызывает тяжелые формы заболевания. При всех формах заболевания основным процессом является гемолиз. Последствие реакции антиген - антитело - гемолиз, поражение печеночных и мозговых капилляров. В зависимости от того, какое поражение преобладает, наблюдаются и различные формы заболевания. Опасны и некоторые анафилактические явления. Они приводят к образованию гистаминоподобных субстанций, вызывающих тяжелейшие поражения печеночной клетки и особенно ганглионарных клеток базальных ядер, аммонового рога, продолговатого мозга и даже коры головного мозга. При поражении печеночных клеток к экстрагепатальной желтухе добавляется и гепатальная. Дети погибают при тяжелых явлениях ядерной желтухи. Если они выживают, остаются симптомы поражений нервной системы (нарушения со стороны экстрапирамидальной системы с хореоатетозными движениями, своеобразной танцующей походкой, принудительными движениями головы, иногда расстройство координации произвольных движений с частым падением, повышенным тонусом мышц, умственной отсталостью, т. е. с признаками так наз. encephalopathia posticteria infantum).
Антиглобулиновый тест, предназначенный для выявления неполных антиэритроцитарных антител, был предложен Кумбсом, Морантом, Рейс в 1945 г. и получил в дальнейшем название пробы Кумбса . Суть данного метода заключается в том, что антиглобулиновая сыворотка, содержащая антитела к иммуноглобулинам человека, при реакции с эритроцитами, сенсибилизированными неполными антителами, приводит к их агглютинации.
В зависимости от того, фиксированы ли антитела на поверхности эритроцитов или находятся в свободном состоянии в плазме крови, применяется прямая или непрямая проба Кумбса.
Прямая проба Кумбса ставится в тех случаях, когда есть основания предполагать, что исследуемые красные кровяные клетки уже in vivo подверглись сенсибилизации соответствующими антителами, т.е. первая фаза реакции — фиксация антител на поверхности эритроцитов — произошла в организме и последующее добавление антиглобулиновой сыворотки вызывает агглютинацию сенсибилизированных клеток.
С помощью непрямой пробы Кумбса выявляют неполные антитела, присутствующие в исследуемой сыворотке. В данном случае реакция протекает в два этапа. Первый этап — инкубация тест-эритроцитов с исследуемой сывороткой, во время которой происходит фиксация на эритроцитарной поверхности антител, содержащихся в исследуемом образце сыворотки. Второй этап — добавление антиглобулиновой сыворотки.
До настоящего времени проба Кумбса широко применяется в лабораторной практике для диагностики иммунопатологических состояний, в частности при аутоиммунных гемолитических анемиях, характеризующихся деструкцией эритроцитов вследствие связывания клеточной мембраны с антителами и (или) компонентами системы комплемента. С его помощью выявляют присутствие на эритроцитарной мембране Ig G (обычно Ig G1 и Ig G3), которые могут активировать комплемент, а иногда и комплемента (С3d). Однако в остром периоде заболевания в связи с разрушением эритроцитов, на которых фиксировалось большое количество антител, при гемолитическом кризе, а также при недостаточном количестве антител при хроническом течении болезни может отмечаться отрицательная прямая проба Кумбса .
Необходимо подчеркнуть, что непрямая проба Кумбса остается наилучшим методом индивидуального подбора трансфузионных сред, так как позволяет наиболее точно установить индивидуальную совместимость донора и реципиента по эритроцитарным антигенам.
Дополнительное выполнение прямого антиглобулинового теста на наличие аутоантител рекомендуется при обследовании всех реципиентов органов и тканей в предтрансплантационном периоде и реципиентов гемопоэтических стволовых клеток также и после трансплантации .
Кроме иммуногематологии и трансфузиологии антиглобулиновые пробы широко применяются при диагностике целого ряда патологических состояний: при гематологических заболеваниях, включая лимфопролиферативные, при системных заболеваниях соединительной ткани, болезни Шегрена, хроническом активном гепатите и др.
Активно используются пробы Кумбса в медицинской генетике и судебной медицине для определения поверхностных эритроцитарных антигенов.
Проба Кумбса относится к достаточно трудоемким методам исследования, требующим особой тщательности в выполнении. При ее использовании встречаются некоторые затруднения, связанные, в частности, с интерпретацией слабоположительных реакций. Известно, что ложные слабоположительные или отрицательные реакции при выполнении проб Кумбса могут быть следствием недостаточно эффективной отмывки эритроцитов, нейтрализации антиглобулинового реагента следами сыворотки, а также контакта с необезжиренной поверхностью, на которой может фиксироваться антиглобулин, теряя при этом свою активность . Еще один недостаток пробы Кумбса — нестойкость антиглобулинового реагента, получение и хранение которого имеют определенные особенности, что также делает затруднительной количественную оценку реакции гемагглютинации с антиглобулиновой сывороткой.
Кроме того, исследования, проведенные А. Holburn , D. Voak et al. , показали, что причиной ложноотрицательных результатов может быть чрезмерное встряхивание при ресуспендировании взвеси эритроцитов. Ошибочные результаты при выполнении антиглобулиновых тестов могут также обусловливаться присутствием в антиглобулиновом реагенте примеси антикомплементарных антител, в частности к С3d-, С3c-, С4c- и С4d- компонентам комплемента, которые адсорбируются на поверхности тест-эритроцитов в процессе инкубации и создают видимость положительного результата .
Указанные недостатки легко устраняются при тщательной отмывке исследуемых образцов и контроле за условиями проведения реакции.
В последнее десятилетие для сокращения времени проведения непрямой пробы Кумбса и повышения ее чувствительности используют изотонический раствор с низкой ионной силой (LISS) .
Неоспоримым преимуществом антиглобулиновых проб, по мнению ряда авторов, является их высокая чувствительность, значительно превосходящая разрешающую способность альтернативных методов исследования, которые используются для выявления неагглютинирующих антител .
Нами было проведено сравнение разрешающей способности методов исследования сывороток крови на наличие неполных антител с применением полиглюкина, желатина и антиглобулиновой сыворотки . В ходе исследования был осуществлен контроль титров неполных анти-D-антител в 140 образцах сывороток крови изоиммунных доноров с применением желатинового, полиглюкинового и непрямого антиглобулинового тестов. Постановка данных методов осуществлялась в соответствии с общепринятыми методиками .
Было установлено, что по своей разрешающей способности методы выявления сенсибилизации эритроцитов анти-D-антителами располагаются следующим образом: наиболее чувствительный — непрямая проба Кумбса, затем желатиновый тест и наименее информативный — полиглюкиновый. Полученные в этой серии опытов результаты в полной мере соответствуют литературным данным, что позволяет сделать вывод о достаточно высоком уровне чувствительности проб Кумбса, позволяющем с большой степенью достоверности идентифицировать присутствие в организме антиэритроцитарных антител, не вызывающих агглютинации красных кровяных клеток.
Тем не менее, при постановке проб Кумбса в практике встречаются случаи, когда неполные антитела не выявляются, хотя клиническая картина заболевания или предшествующая иммунизация указывает на возможное их присутствие. В таких случаях можно предположить, что количества антител недостаточно для того, чтобы они преципитировались антителами антиглобулиновой сыворотки.
Сделанный вывод подтвержден собственным экспериментом, в котором с помощью метода аналитического микроэлектрофореза клеток было установлено наличие на тест-эритроцитах анти-D-антител, не определяемых в непрямой пробе Кумбса. В этой серии опытов антиглобулиновая сыворотка добавлялась к эритроцитам, предварительно инкубированным с сыворотками, полученными из крови иммунизируемых доноров, в период антителогенеза в ходу, т.е. в период, когда известными методами, в том числе пробой Кумбса, антитела в них не определялись.
В проведенных исследованиях доказательством присутствия неполных антител на поверхности эритроцитов служило статистически значимое изменение величины электрофоретической подвижности сенсибилизированных красных кровяных клеток после добавления антиглобулиновой сыворотки. Необходимо отметить, что в последующем у всех иммунизированных доноров в непрямой пробе Кумбса в сыворотке крови определялись анти-D-антитела.
Gillerand et al. также показали, что для антиглобулиновых тестов характерен определенный порог чувствительности: положительный результат отмечается лишь тогда, когда на поверхности одного эритроцита фиксируются не менее 500 молекул Ig G.
Кроме того, в литературе приводятся данные в пользу того, что возможный отрицательный результат пробы Кумбса может быть связан с низкой аффинностью антител, сенсибилизирующих эритроциты, вследствие чего они легко элюируют с поверхности красных кровяных клеток в процессе отмывания .
С учетом вышесказанного можно сделать вывод, что в ряде случаев отрицательный результат пробы Кумбса еще не есть доказательство отсутствия фиксированных на поверхности эритроцитов антител.
Известно, что реакции Кумбса обладают высокой специфичностью и позволяют обнаружить большинство разновидностей неполных антител. Однако, как показывают некоторые экспериментальные данные, антиглобулиновые пробы могут оказаться положительными и при неиммунологических состояниях. E. Muirhead et al. на второй день после введения фенилгидразина собакам наблюдали положительную пробу Кумбса. Столь быстрое появление положительной реакции свидетельствует против ее иммунологической природы и, скорее, связано с неспецифической адсорбцией белка на поверхности эритроцитов.
M. Williams et al. установили, что клавулановая кислота также может быть причиной положительной реакции, что, по мнению авторов, связано с неспецифической адсорбцией плазменных белков на эритроцитарной поверхности. Аналогичный эффект наблюдался и при лечении цефалоспориновыми антибиотиками .
Авторы вышеприведенных исследований подчеркивают неиммунологический характер полученных положительных результатов проб Кумбса и настаивают на том, что указанные вещества способны вызывать модификацию мембран красных кровяных клеток, в результате которой эритроциты могут адсорбировать белки (в частности, альбумин), в норме присутствующие в плазме крови и не обладающие свойствами антител. Кроме того, возможно, именно ксенобиотик, адсорбируясь на клеточной поверхности, служит связующим звеном между мембраной клетки и белками плазмы.
Для правильного толкования результатов постановки антиглобулиновых проб следует учитывать и количественное соотношение между молодыми и зрелыми эритроцитами в периферической крови. Было установлено, что ретикулоциты, выделенные из организма в период усиленной регенерации эритрона, могут агглютинироваться антиглобулиновой сывороткой .
Положительный результат прямого антиглобулинового теста отмечается и при различных патологических состояниях, сопровождающихся нарушениями иммунной системы, воспалительными процессами, ведущими к неспецифической адсорбции антител разной специфичности на мембранах эритроцитов. Это дает основание полагать, что молекулы Ig G не взаимодействуют со специфическими антигенами эритроцитов, а только фиксируются на поверхности исследуемых клеток .
Следует учитывать, что при постановке пробы Кумбса в случаях заболеваний, характеризующихся развитием диспротеинемии или появлением парапротеинов, положительный результат обусловлен присутствием на поверхности эритроцитов белков, не обладающих свойствами антител , что также свидетельствует о недостаточной специфичности антиглобулиновых проб относительно природы выявляемого с их помощью белка.
Таким образом, как показали многочисленные исследования , положительные результаты прямого и непрямого антиглобулиновых тестов не являются абсолютным доказательством наличия антител, поскольку положительные реакции могут наблюдаться и при различных патологических состояниях, не связанных с изосенсибилизацией или аутосенсибилизацией организма. Поэтому только сопоставление результатов нескольких иммуносерологических методов с клинической картиной заболевания позволяет в полной мере судить о развивающемся патологическом процессе.
Положительный непрямой антиглобулиновый тест при отрицательной прямой пробе обычно указывает на присутствие в исследуемой сыворотке аллоантител в свободном состоянии, связанное с предшествующими переливаниями крови или беременностями.
Проба Кумбса часто бывает положительной при обострении пароксизмальной ночной гемоглобинурии; позитивная проба Кумбса с анти-С3 и анти-С3dg является маркером холодовой агглютининовой болезни .
В случаях, когда велик риск развития гемолитической болезни новорожденных, большое значение для постановки диагноза (чаще всего во время беременности) и при необходимости динамического наблюдения за появлением и изменением титра антител имеют результаты прямого и непрямого антиглобулиновых тестов . Чаще всего гемолитическая болезнь новорожденных связана с несовместимостью матери и плода по антигену D, реже — по антигенам системы АВ0 и еще реже — по другим антигенам (С, с, К и др.). Образующиеся при этом антитела, будучи, как правило, неполными антителами класса Ig G, четко выявляются в непрямом антиглобулиновом тесте. При данном заболевании большое значение имеют правильно установленные титр и специфичность выявленных антител, поскольку существует определенная корреляция между уровнем антиэритроцитарных антител в крови беременной женщины и возможным прогнозом тяжести гемолитической болезни .
Непрямая проба Кумбса также необходима в клинической практике в целях обеспечения проведения безопасной трансфузионной терапии . Ее выполнение является обязательной составляющей иммуногематологических исследований доноров и различных категорий реципиентов, а также плановых обследований всех пациентов лечебно-профилактических учреждений, которым может потребоваться переливание крови и ее компонентов.
Непрямой антиглобулиновый тест применяется в следующих случаях:
Для более точного установления резус-принадлежности (антиген D) при нечетких результатах определения резус-фактора другими методами (полиглюкиновый, желатиновый и др.);
Для выявления слабых эритроцитарных антигенов (системы Келл, Даффи, Кидд, Льюис и др.) и антител к этим антигенам;
Для обнаружения и идентификации аллоиммунных антиэритроцитарных антител, включая антитела, вызывающие гемолитические посттрансфузионные реакции;
Для определения наличия иммунных антител системы АВ0 при трансфузионных гемолитических осложнениях;
В качестве пробы на совместимость при индивидуальном подборе переливаемой крови и ее компонентов.
Таким образом, проба Кумбса является важным диагностическим тестом, применяемым в различных областях медицины (гематология, акушерство, ревматология, трансфузиология, клинико-лабораторная диагностика и др.). Знание особенностей постановки пробы Кумбса поможет повысить достоверность полученных результатов и будет способствовать правильной трактовке лабораторных данных.
Литература
1. Антитела. Методы / под ред. Д. Кэтти. — М.: Мир, 1991.
2. Байрамалибейли И.Э., Рагимов А.А., Гаджиев А.Б . // Трансфузионная терапия анемий: учеб. пособие для врачей. — М.: Практ. медицина, 2005. — С. 105—106.
3. Волкова О.Я., Фрегатова Л.М., Левченко Л.Б. // Трансфузиология. — 2006. — №2 . — С. 39—62.
4. Донсков С.И. // Группы крови системы Rhesus: теория и практика. — М.: ВИНИТИ РАН, 2005. — С. 180—186, 195.
5. Иммуносерология (нормативные документы) / сост. А.Г. Башлай, С.И. Донсков. — М.: ВИНИТИ РАН, 1998.
6. Исследование системы крови в клинической практике / под ред. Г.И. Козинца, В.А. Макарова. — М.: Триада-Х, 1997.
7. Левин В.И . К механизму эритродиереза и эритропоэза в период острой постгеморрагической анемии: автореф. дис. …канд. мед. наук. — Минск, 1968.
8. Рагимов А.А., Байрамалибейли И.Э . // Основы диагностики, профилактики и лечения анемий. — М.: ГОУ ВУНМЦ МЗ РФ, 2002. — С. 204—209.
9. Чумакова Е.Д . // Актуальные проблемы гематологии и трансфузиологии: м-лы VI съезда гематологов и трансфузиологов Республики Беларусь, Минск, 24—25 мая 2007 г. / под ред. А.И. Свирновского, М.П. Потапнева. — Минск: РНПЦ гематологии и трансфузиологии, 2007. — С. 50.
10. Coombs R., Mourant A., Race R . // Lancet. — 1945. — Vol. 2. — P. 15.
11. Freedman J . // J. Clin. Pathol. — 1979. — Vol. 32. — P. 1014—1018.
12. Holburn A.M . Quality Control. Methods in Hematology /ed. I. Cavill. — Edinburg: Churchill Livingstone, 1982. — Vol. 4. — P. 34—50.
13. Khan S. // CMAJ. — 2006. — Vol. 175, N 8. — P. 919.
14. Komatsu F. // Nippon Rinsho. — 2005. — Vol. 63 (suppl. 7). — P. 719—721.
15. Komatsu F. // Nippon Rinsho. — 2005. — Vol. 63 (suppl. 7). — P. 716—718.
16. Molthan L., Reidenberg M.M., Eihman M.F. // New Engl. J. Med. —1976. — Vol. 277. — P. 123—125.
17. Muirhead E.E., Groves M., Brian S . // J. Lab. Clin. Med. —1954. — Vol. 44. — P. 902—903.
18. Rosse W.F. // Hosp. Prac. — 1995. — N 105.
19. Voak D., Downie D., Moore B. et al. //Biotests Bull. — 1986. — Vol. 1. — P. 41—52.
20. Voak D., Haigh T., Downie D. et al. Cell Washing machines for antiglobulin tests. Replicate testing — a new method demonstrating the inefficiency of one widely used machine — the Sorvall CW1-AF2: report to the DHSS Technical Branch, February 1991.
21. Williams M.E., Thomas D., Harman C. P . et al. //Antimicrobial Agents and Chemotherapy. —1985. — P. 125—127.
22. Zarandona J.M., Yazer M.H . // CMAJ. — 2006. — Vol. 174, N 3. — P. 305—307.
Медицинские новости. - 2008. - №3. - С. 33-36.
Внимание! Статья адресована врачам-специалистам. Перепечатка данной статьи или её фрагментов в Интернете без гиперссылки на первоисточник рассматривается как нарушение авторских прав.
Проба Кумбса – это клинический анализ крови, который проводится, чтобы выявить, содержит ли кровь определенные антитела, которые могут быть небезопасны. Эти антитела приклеиваются к эритроцитам и могут вторгнуться в иммунную систему, а также нанести вред другими способами. В медицинской терминологии это исследование также называют антиглобулиновым тестом (АГТ).
Типы проб Кумбса
Существует два типа проб Кумбса – прямой и непрямой.
Прямая проба Кумбса , также известная как прямой (ПАТ), выявляет ауто-антитела, которые прикрепляются к поверхности эритроцитов. Эти антитела иногда производятся в организме вследствие определенных заболеваний или при приеме определенных медикаментов, таких как прокаинамид, метилдопа или хинидин.
Данные антитела опасны, потому что иногда они вызывают анемию, разрушая эритроциты.
Данный тест иногда назначается для диагностики причины желтухи или анемии.
В норме реакция Кумбса отрицательная.
Положительно при:
- гемолитической болезни новорожденных;
- аутоиммунном гемолизе;
- гемолитических трансфузионных реакциях;
- лекарственной иммунной гемолитической анемии.
Непрямая проба Кумбса , также известная как , используется для обнаружения антител к эритроцитам, содержащимся в сыворотке крови (сыворотка – это прозрачная желтая жидкость крови, которая остается после того, как выводятся красные кровяные тельца и коагулянт).
Непрямая проба Кумбса применяется при переливании крови для определения того, совпадает ли кровь донора с кровью реципиента. Это называется пробой на совместимость, она помогает предотвратить любую неблагоприятную реакцию на кровь донора. Данный анализ также рекомендован беременным женщинам. Некоторые женщины имеют антитела класса IgG, которые могут проникать через плаценту в кровь плода и нанести вред новорожденному, вызвав гемолитическое заболевание, известное как гемолитическая анемия.
Процедура
Кровь берется посредством шприца из вены, обычно с тыльной стороны ладони или на сгибе локтя. Место прокола пред этим тщательно дезинфицируется, а после взятия анализа крови накладывается чистая марля или вата.
Полученная кровь очищается в лаборатории, при этом отделяются красные кровяные тельца. Образец затем последовательно исследуется с применением различных реагентов сыворотки и Кумбса, который противопоставляется . Если не случается агглютинации (слипания красных кровяных телец), это означает положительный результат.
Однако если тест отрицательный, это означает, что в крови имеются антитела, которые действуют против эритроцитов. Это может указывать на различные заболевания, такие как анемия (как естественная, так и спровоцированная приемом медикаментов), сифилис, или микоплазменная инфекция. После получения результатов лечащий врач назначит соответствующее лечение.
Видео
На поверхности эритроцитов находится большое количество антигенов. В зависимости от вида этих антигенов выделяют группы крови, самые изученные группы - АВО, Rh, Kell, Duffy и мн...
Средняя цена в вашем регионе: 2645 от 2645 … до 2645
1 лабораторий делают данный анализ в вашем регионе
Описание исследования
Подготовка к исследованию: Кровь берут из вены, а затем получают сыворотку (плазма крови без фибриногена) путем естесственного свертывания или путем осаждения фибриногена. Исследуемый материал: Взятие крови
На поверхности эритроцитов находится большое количество антигенов. В зависимости от вида этих антигенов выделяют группы крови, самые изученные группы - АВО, Rh, Kell, Duffy и многи другие системы. В норме в крови существуют антитела к антигенам другой группы, но при переливании крови, беременности, аутоиммунных заболеваниях и др. обнаруживаются антитела к своим антигенам.Неполные антитела к эритроцитам
Метод
Непрямая реакция Кумбса основана на выявлении агглютинации (слипания) эритроцитов, у которых на поверхности имеются неполные антитела, которая появляется при добавлении антиглобулиновой сыворотки.
На первом этапе в одну пробирку вносят донорские эритроциты (O(I) группа, Rh+) и исследуемую сыворотку. Если неполные антитела к эритроцитам присутствуют в исследуемой сыворотке, то они фиксируются на поверхности донорских эритроцитов.
На втором этапе на стекло наносят донорские эритроциты с антителами (если они были) и стандартную антиглобулиновую сыворотку с антителами к человеческим иммуноглобулинам. Если на первом этапе антитела к эритроцитам зафиксировались на поверхности эритроцитов, то при добавлении стандартной сыворотки эритроциты склеиваются из-за взаимодействие антител.
Референсные значения - норма
(Реакция Кумбса непрямая (антиглобулиновый тест, выявление неполных антиэритроцитарных антител), кровь)
Информация, касающаяся референсных значений показателей, а также сам состав входящих в анализ показателей может несколько отличаться в зависимости от лаборатории!
Норма:
В норме антител к собственным эритроцитам не должно быть, при постановке реакции Кумбса агрегации эритроцитов не происходит.
Показания
Исследование гуморального специфического иммунитета при подозрении на аутоиммунные реакции в организме, резус-конфликт между матерью и плодом, определение совместимости крови донора и реципиента
Повышение значений (положительный результат)
Антитела к эритроцитам обнаруживают при:
1. Аутоиммунных гемолитических анемиях
2. Гемолитической болезни новорожденных
3. Системных заболеваниях соединительной ткани
4. Хроническом активном гепатите и др.
Гемолитические анемии , вызванные аутоиммунными телами, которые направлены против собственных эритроцитов, точно не выяснены. Однако предполагается, что какие-то факторы (например, вирус, ненормальный белок) так изменяют эритроциты, что организм воспринимает их уже «как нечто чуждое» и вступает с ними в борьбу с помощью антител. По другой теории, направленные против эритроцитов антитела возникают почти случайно в процессе образования ненормальных белковых тел плазмы при некоторых болезнях. Такие белковые тела, точно так же «случайно», могут дать реакции, которые можно использовать для постановки диагноза (например, вирусная пневмония, как известно, дает положительную реакцию Вассермана, положительную реакцию Пауль - Буннеля и реакцию холодовой агглютинации).
Имеются два главных типа аутоантител при гемолитических анемиях, а именно: тепловые антитела (реагируют при 37°) и холодовые антитела (реактивная способность которых усиливается по мере приближения температуры к нулю). Тепловые антитела встречаются чаще Холодовых. Dacie нашел, что тепловые гемолизины встречаются в 2 раза чаще, чем холодовые. Гемолизины и агглютинины не являются принципиально различными антителами: они различаются только характером их действия. Агглютинины агглютинируют эритроциты, а гемолизины делают их более подверженными сложному процессу гемолиза (комплемент!). Аутоантитела, фиксируясь на эритроцитах, образуют комплекс эритроцит - глобин. Этот комплекс выявляется с помощью антиглобиновой пробы Кумбса.
Проба Кумбса проводится с сывороткой Кумбса, для приготовления которой сенсибилизируют кролика сывороткой человека, против которой в сыворотке кролика образуются антитела. При действии такой сенсибилизированной сыворотки на эритроциты человека наступает их агглютинация, если рецепторы эритроцитов заняты блокирующими антителами. Так как эти блокирующие антитела происходят из сыворотки человека, они дают агглютинацию с сывороткой кролика, сенсибилизированной к плазме человека и содержащей преципитины. Эта реакция названа пробой Кумбса; для гемолитической анемии на почве аутоиммунных тел (Lo tit) она почти специфична (подробности см. у Maier).
В общем при гемолитических анемиях с первичным нарушением эритроцитов проба Кумбса отрицательна, а при приобретенных - положительна. Однако из этого правила имеются некоторые исключения: ложноположительная проба Кумбса найдена при кризах конституциональных гемолитических анемий, а в слабой степени - также иногда после спленэктомии, при ревматическом полиартрите, саркоидозе, после частых переливаний крови и при системной красной волчанке. Естественно, что при приобретенных гемолитических анемиях без образования аутоиммунных тел она отрицательна.
Гемолитические анемии
, вызванные аутоиммунными телами, можно подразделить на:
а) острые, подострые и хронические формы, а также на
б) идиопатические с неизвестной этиологией и в) симптоматические [вирусная пневмония (только холодовые агглютинины), хронический лимфатический лейкоз, ретикулосаркома, лимфосаркома, системная красная волчанка (преимущественно тепловые, реже холодовые агглютинины), сифилис (холодовые агглютинины), опухоли яичников (Miescher с сотрудниками)).
в) симптоматические [вирусная пневмония (только холодовые агглютинины), хронический лимфатический лейкоз, ретикулосаркома, лимфосаркома, системная красная волчанка (преимущественно тепловые, реже холодовые агглютинины), сифилис (холодовые агглютинины), опухоли яичников (Miescher с сотрудниками)).
Клиника гемолитических анемий , развивающихся под действием аутоиммунных тел, очень разнообразна, и вряд ли поэтому можно нарисовать их общую клиническую картину. Поражаются лица всех возрастов и обоих полов равномерно. Все же идиопатические формы как будто чаще наблюдаются у женщин (Sacks и Workman).
Клиническая картина идиопатической формы изменяется в зависимости от тяжести заболевания. В хронических случаях начало постепенно, болезнь тянется многие годы с частыми обострениями. Тяжесть анемии различна в зависимости от степени гемолиза. Наблюдаются падения гемоглобина до 10%, в других случаях гемоглобин длительно удерживается на 50-60%. Интенсивность ретикулоцитоза и желтушной окраски кожи и сыворотки соответствует степени гемолиза. Билирубин в моче находят очень редко, так как он не проходит через почки, но гемоглобинурия наблюдается. Селезенка в хронических случаях чаще увеличена и может даже достигать очень значительных размеров, в других же случаях она еще прощупывается. Печень редко когда не увеличена.
В крови в большинстве случаев наблюдается макроцитоз, в острых стадиях также много микроцитов, редко отсутствуют нормобластоз и полихромазия, лейкоцитоз может достигать 30 000, тромбоциты в норме. В некоторых случаях, однако, имеется выраженная тромбоцитопения. Evans объясняет эти случаи одновременным наличием антител против тромбоцитов, так что налицо имеются одновременно гемолитическая анемия и тромбоцитопения на почве действия аутоиммунных тел- синдром Эванса (Evans). Осмотическая резистентность слегка понижена, но не в такой степени и не так постоянно, как при конституциональной шаровидноклеточной анемии. Проба на устойчивость к нагреванию (Hegglin- Maier) после 6 часов также может дать незначительный гемолиз (собственное наблюдение), но меньшей степени, чем лри анемии Маркиафава. В моче находят также гемосидерин (собственное наблюдение).