☰

Что означает негативный нер 2 при рмж. Иммуногистохимическое исследование

Исполнительный директор
Некоммерческого партнерства "Равное право на жизнь",
Д.А. Борисов

Онкология: проблема имеет решение

Современная российская статистика пугает: каждый год в стране онкология обнаруживается более чем у 500 тысяч человек . Из них около 300 тысяч умирает. Каждый третий из тех, у кого сегодня впервые обнаружили заболевание, погибнет в течении 12 месяцев. Во многом это связано с отсутствием информации: люди ничего не знают о том, где, как и зачем нужно и можно проходить обследование с целью выявления заболевания на ранней стадии, и, даже услышав свой диагноз, многие пациенты не могут получить необходимое им лечение в полном объеме.

Свои проблемы есть и в медицинских учреждениях. Увы, современная техника для лечения онкологических заболеваний сегодня доступна далеко не во всех городах. Персонал мало обучен: хирурги, химиотерапевты и радиологи нуждаются в получении актуальных квалифицикационных знаний.

Некоммерческое партнерство «Равное право на жизнь» пытается решать эти проблемы. Начиная с 2006 года мы стараемся максимально эффективно реализовать главную цель нашей программы : обеспечить равенство прав российских больных и российских врачей-онкологов на информацию о современных достижениях в мировой онкологии.

В ходе реализации программы проходят образовательные мероприятия для врачей-онкологов. Стажировки специалистов проводятся на базе ведущих медицинских центров страны. Также действует и программа по реализации выездных сертификационных циклов и мастер-классов с привлечением ведущих специалистов нашей страны.

Наравне с этим проводится модернизация материально-технической базы региональных онкологических лечебных учреждений: закупается современное оборудование, а также осуществляются ремонтные работы за счет внебюджетных средств на безвозмездной основе.

Онкология хорошо поддается лечению на ранних стадиях. Чтобы каждый смог проконсультироваться с опытным специалистом и узнать информацию о современных методах борьбы с онкологическими заболеваниями (передается ли онкология, каковы ее симптомы, методы диагностирования и лечения), в 2006 году была создана специальная горячая линия «Равное право на жизнь».

Количество тематических мероприятий для жителей страны растет с каждым годом, ведь рак - это проблема, о которой должен знать каждый.

Резюме: с целью выбора оптимального метода диагностики и лечения (таргетная терапия) рака молочной железы (РМЖ) определение онкобелка HER-2neu и сопоставление полученных данных с клинико-морфологическими показателями создает возможность выявления прогностической ценности HER-2neu. В результате исследования было оценено значение экспрессии онкобелка в клиническом течении заболевания, а также в вопросе определения вероятности рецидива болезни и чувствительности в отношении к таргетной терапии.

Ведение


Рак молочной железы (РМЖ) занимает ведущее место в структуре онкологической заболеваемости среди женского населения. Несмотря на достаточно высокий уровень ранней диагностики, ежегодно в мире регистрируется почти 700 тысяч новых случаев РМЖ, а в странах СНГ - более 50 тысяч . Что касается Республики Армения,то ежегодно выявляется 700-800 первичных больных раком молочной железы со стойкой тенденцией к увеличению. Обнадеживающей новостью в нашем тысячелетии является то, что в некоторых странах, в том числе и в Армении, снижается уровень смертности от РМЖ.

За последние годы достигнуты значительные успехи в диагностике и лечении различных форм РМЖ. В оценке опухолевого потенциала, помимо традиционных критериев,используют молекулярно-генетические маркеры, большинство которых пока еще прочно не вошли в рутинную практику, что определяется высокой стоимостью подобных исследований и сложностью интерпретации данных одновременного анализа многих прогностических факторов . Результаты изучения их прогностической значимости существенно различаются у разных авторов из-за использования разных методов и вариабельности результатов, получаемых в разных лабораториях . Между тем, использование традиционных молекулярных маркеров (экспрессия онкобелка HER-2neu) и корреляции их с клинико-морфологическими показателями с использованием современных методов статистического анализа позволит разработать модели индивидуального прогнозирования течения заболевания.

Цель исследования

Определить экспрессию онкобелка HER-2neu и выявить взаимосвязь полученных данных с клинико-морфологическими характеристиками РМЖ в целях выбора оптимального метода диагностики и лечения, что позволит определить прогностическую значимость онкобелка HER-2neu.

Для достижения цели были поставлены следующие задачи:

  1. Определить экспрессию онкобелка HER-2 neu
  2. Определить факторы, обуславливающие биологическую активность опухоли: стадия заболевания TNM, гистологическая форма опухоли и степень злокачественности ( G), рецепторный статус опухоли (РЭ, РП)
  3. Установить характер корреляционных связей между клинико-морфологическими факторами и экспрессией онкобелка HER-2neu

Материал и методы

Для исследования был использован материал от 256 пациенток, страдающих РМЖ, в возрасте от 25 лет до 78 года, большинство из которых (194) в возрасте от 41 до 60 лет.Все больные подвергались комплексному клинико-лабораторному обследованию и получили лечение в Национальном Центре Онкологии РА (НЦО) в период 2007-2010гг.

Патогистологическое исследование является существенным информативным методом, позволяющим получить наиболее полную информацию о гистологической форме рака, степени злокачественности, оценить состояние регионарного лимфатического коллектора, а в ряде случаев (при проведении неоадъювантной терапии)- определить степень лечебного патоморфоза.

Гистологическое исследование материала проводилось на базе отделения клинической патоморфологии.Исследовалась ткань опухоли, перитуморозные участки и лимфатические узлы.Материал фиксировался в 10%-ном растворе нейтрального формалина, обезвоживался, проводился через промежуточные среды (спирты 1,2,3) с последующей заливкой в парафин. Срезы с парафиновых блоков толщиной 5-6 мкм окрашивались гематоксилином и эозином.

Иммуногистохимические исследования проводились на базе отделения клинической патоморфологии Национального Центра Онкологии совместно с Центром Генетики по стандартной методике ( Hercept- test - DAKO). Общепринятым и наиболее адекватным методом оценки чувствительности опухоли к Герцептину является использование иммуногистохимического окрашивания опухолевых тканей на белок HER2-neu.Следует подчеркнуть, что оценка результатов проводилась только при инвазивном раке, так как структуры рака in situ, несмотря на выраженную гиперэкспрессию белка, учету не подлежат. При оценке результатов реакции учитывалась экспрессия только в инвазивном компоненте опухоли.Оценка результатов реакции проводилась с помощью бальной шкалы оценки 0, 1+, 2+, 3+, разработанной производителем теста и одобренной FDA (Food and Drug Administration) США.

Результаты исследования и их обсуждение


В исследование было включено 256 пациенток с РМЖ в возрасте от 25 до 78 лет. У большинства больных- 153 (59.8%) - выявлена отрицательная экспрессия онкобелка HER-2 neu (0/1+), у 67-и (26.2%) - положительная (2+), а у 36-и (14.1%) - положительная (3+).

В целях диагностики и выбора оптимального лечения полученные данные были сопоставлены с клинико-морфологическими факторами и проведен подробный статистический анализ.

К числу клинико-морфологических факторов относятся: возраст ,стадия заболевания - p TNM,гистологическая форма рака, степень злокачественности, гормональный статус - эстроген, прогестерон,локализация опухоли,фактор веса и роста,наследственность, сопутствующие заболевания, кормление грудью, аборты.

1. По возрастному фактору пациентки разделились на 3 группы:




  1. В группу от 25 до 40 лет вошли 27 пациенток (10.5%), из которых экспрессия онкобелка HER-2 neu составила 0/1+, - у 55%, 2+у - 26%, 3+ - 19%.
  2. В группу от 41 до 60 лет вошли 194 пациенток (75.8%), из которых экспрессия онкобелка HER-2 neu составила: 0/1+ - у 62%, 2+ у - 23%, 3+ у 15%.
  3. В группу от 61 до 78 лет вошли 35 пациенток (13.7%), из которых экспрессия онкобелка HER-2 neu составила: 0/1+ - у 48%, 2+ у 43%, 3+ у 9%.

Таким образом, по результатам проведенного статистического анализа стало ясно, что в группе пациенток в возрасте от 41 до 60 лет отрицательная экспрессия онкобелка HER-2 neu (0/1+) составила наибольший процент - 62% . Одновременно было установлено, что положительная экспрессия онкобелка HER-2neu преобладает в группе больных 25-40 лет: 2+ у 26% и 3+ у 19% а в группе 61 и старше соответственно 43% и 9%.

2 . Стадия заболевания - p TNM


Среди обследованных больных Т2 имело место у 59%, Т1 - 28.9%, а Т3 и Т4 составляли, соответственно 5.5% и 6.6% от общего числа пациенток.


Анализ пред ставленных данных показал, что с увеличением символа Т возрастает число пациенток с HER-2-nеu положительными опухолями. Распределение экспрессии HER-2 neu в зависимости от размера опухоли в каждой группе составляет:

  • рT1 - 0/1+ 64%, 2+ 22%, 3+ 14%
  • рТ2 - 0/1+ 60%, 2+ 27%, 3+ 13%
  • рТ3 - 0/1+ 50%, 2+ 29%, 3+ 21%
  • рТ4 - 0/1+ 53%, 2+ 35%, 3+ 12%

По критерию метастазов в лимфоузлах наибольший процент составили пациентки с наличием рN1 - 42.6%, (рN0- 41.4 %), рN2 - 9.8%б, а рN3 1.6% и (рNx 4.7%), составили незначительное количество. Распределение экспрессии HER-2neu в зависимости от метастазов, в лимфоузлах в каждой группе показало, что с возрастанием фактора N+, возрастает также положительная экспрессия HER-2 neu, которая при N3 в сумме (2+ 25%, 3+ 50%) составила 75%.

Так как у 96.1% больных клинически не было выявлено отдаленных метастазов(Мx),то на основании имеющихся данных сделать какой-либо вывод не представилось возможным.

3. Гистологическая разновидность РМЖ

Наибольее часто встечался инвазивный протоковый рак (ИПР)- 60.2%. В этой группе из 154 больных отрицательная экспрессия HER-2 neu зафиксирована у 55.8 %, а положительная : 2+ у 27.3% и 3+ у 16.9%.

Затем смешанный тип рака : инвазивный протоковый рак (ИПР) и инвазивный дольковый рак (ИДР)- 21.9%. В данной группе из 56 человек отрицательная экспрессия HER-2 neu зафиксирована у 66.1 %, а положительная : 2+ у 21.4% и 3+ у 12.5%.

На третьем месте ИДР 10.9% - 28 больных, из которых отрицательная экспрессия HER-2 neu наблюдалась у 60.7%, 2+ у 32.1% и 3+ у 7.1%.

У пациеток с другими типами рака - медулярный (0.8%), тубулярная аденокарцинома (1.2%), рак Педжета (1.2%),слизистый рак (0.8%), ИПР с внутрипротоковым компонентом (1.6%), - преобладала отрицательная экспрессия HER-2 neu, что составляет в среднем 70%.

Таким образом, положительная экспрессия HER-2neu преобладала при инвазивной протоковой и смешанной формах РМЖ.

4. Степень злокачественности


Степень злокачественности наблюдалась у незначительго числа пациенток - 3.1%, у которых экспрессия HER-2neu была отрицательной.

Среди обследуемых больных у 58.6% выявлена II степень злокачественности опухоли, при которой положительная экспрессия HER-2 neu составила 2+ у27% и 3+ у13%. Однако положительная экспрессия HER-2 neu достигла пика при III степени злокачественности, что составило 2+ у28% и 3+ у25%.

Следовательно, существует прямая связь между степенью злокачественности опухоли и экспрессей онкобелка HER-2neu.

5 . Гормональный статус - эстроген, прогестерон


Результаты исследований показали, что 30.5% составили больные с эстроген-прогестерон отрицательным статусом, у 60.2% наблюдался положительный статус. У 6.3% отмечен эстроген положительный и прогестерон отрицательный статус. И, наконец, у 3% больных зафиксирован эстроген отрицательный и прогестерон положительный статус.

Анализ данных показал, что при эстроген-прогестерон положительном статусе преобладала отрицательная экспрессия HER-2neu, а при эстроген-прогестерон отрицательном статусе - положительная экспрессия HER-2neu.

Следует отметить, что при эстроген положительном-прогестерон отрицательном и обратном статусах не наблюдалось статистически значимых закономерностей.

6 . Локализация опухоли


На рисунке приведено процентное соотношение локализации опухоли. Так, 54.7% случаев составил рак левой, а 45.3% - правой молочной железы.

Необходимо отметить, что не было выявлено статистически значимых закономерностей зависимости положительной экспрессии HER-2neu от локализации опухоли.

Рассматривалось также распределение по квадрантам.

Наиболее часто первичная опухоль выявилась в верхне-наружном квадранте (56,6% ) ,поражение нижне-наружнего - 12,1% и верхне-внутреннего - 11,3% квадрантов установлено в почти с одинаковой частотой.У 7.7% больных опухоль распологалась в центральной зоне.Поражение нижне-внутреннего квадранта и мультицентричное расположение опухоли отмечалось соответственно у 6,4% и 5.9% больных.

7 . Фактор веса и роста


С целью выяснения взаимосвязи веса, роста больных и экспрессии HER-2 neu был введен коэффициент который равен соотношению веса и роста. Например, при весе 75кг и росте 150см, коэффициент равен 0.5.

Из нижеприведенной диаграммы становится ясно, что у группы больных с выраженным фактором ожирения (33.2%) экспрессия HER-2neu наблюдалась реже, чем у тех женщин, у которых соотношение веса и роста находится в пределах относительной нормы (66.8%).

8. Фактор наследственности - составил всего 16.4% от общего числа пациенток.

Положительная экспрессия онкобелка HER-2neu преобладала в группе больных с наличием фактора наследственности (42 больных): 2+ у 29% и 3+ у 19%: Закономерной связи наследственности с экспрессией онкобелка HER-2 neu не наблюдалось.

9. Сопутствующие заболевания


Информация о сопуствующих заболеваниях относительно 46.9% больных отсутствует. При формировании группы учитывались следующие факторы:наличие гиперпластических и воспалительных заболеваний яичников и матки, эндокринно-метаболических факторов - ожирения, гипертонической болезни, сахарного диабета, заболеваний печени, патологии щитовидной железы. Среди сопуствующих заболеваний наибольший процент - 21.9% составили гиперпластические и воспалительные заболевания яичников, матки и молочных желез , затем следовал сахарный диабет - 5.1%, патологии щитовидной железы - 3.9% и другие болезни - 22.3% (аденома гипофиза, арахноидит, ангиомиолипома почки, нефропатия, гепатит, гемангиома печени, желчно-каменная болезнь, гастрит, варикозная болезнь).

Анализ данных показал, что положительная экспрессия онкобелка HER-2 neu преобладает при наличии - 2+ у28%, 3+ у20%, затем при патологии щитовидной железы и других болезнях, что составляет соответственно - 2+ у30% и 27%, 3+ у10% и 12%. При сахарном диабете не выявлено статистически значимых результатов положительной экспрессии HER-2 neu, которая составляет всего лишь 2+ у8% и 3+ у15%.

10. Кормление грудью


Из общего числа больных 54.3% составили пациентки, которые кормили грудью, 41.8% - не кормящие и 3.9% с осложнениями.

Фактор кормления грудью не оказал значимого влияния на эскпрессию HER-2 neu, однако, следует отметить, что в группе больных с осложнениями наблюдалась тенденция роста эскпрессии HER-2neu : 2+у 20% и 3+ у30%.

11. Аборты


У большинства больных - 62.5% - зафиксированы аборты, при которых наблюдался рост эскпрессии HER-2neu 2+ у24% и 3+ y9%.

Заключение

Положительная экспрессия HER-2neu преобладает при инвазивной протоковой и смешанной формах РМЖ (солидные опухоли). Существует прямо пропорциональная связь между степенью злокачественности ( G) опухоли и экспрессией онкобелка HER-2neu.При эстроген-прогестерон отрицательном статусе наблюдается положительная экспрессия HER-2neu.С увеличением критерия Т возрастает число пациенток с HER-2nеu-положительными опухолями; с возрастанием фактора N+, возрастает также положительная экспрессия HER-2neu. Так как у 96.1% больных клинически не было выявлено отдаленных метастазов, то на основании имеющихся данных прийти к какому-либо выводу становится невозможно. П ри мультицентричном РМЖ доминирует положительная экспрессия HER-2neu. В остальных случаях не выявлено статистически значимых акономерностей.Положительная экспрессия онкобелка HER-2neu преобладает в группах больных в возрасте 25-40 лет и старше 61 года.Не наблюдается зависимости экспрессии HER-2neu от факторов веса, роста, наследственности и фактора кормления грудью.Положительная экспрессия онкобелка HER-2neu преобладает при наличии гиперпластических и воспалительных заболеваний яичников, матки и молочных желез .

Анализ данных показывает, что биологическая активность опухоли находится в прямой зависимости от гиперэкспрессии онкобелка HER-2neu.

Библиогафия


  1. Возный Э.К., 2000; Трапезников Н.Н., Аксель Е.М.,2001
  2. Галстян А.М.,Минасянц А.С., 2007
  3. Miller В .А ., 1991; Levi F., 1993; SoudikEJ., 1994
  4. Герштейн Е.С., Кушлинский Н.Е., 2002.
  5. Gohring U- J. et al., 1996; Allred D. C. et al. , 1998

Стандартизованное иммуногистохимическое исследование: рецепторный статус при раке молочной железы (PR, ER, ki67, Her2 neu). Выполняется только при наличии готового микропрепарата на предметном стекле и образца ткани в парафиновом блоке.

Синонимы русские

ИГХ-исследование (РЭ, РП, Her2/neu, Ki-67), иммуногистохимический анализ рецепторного статуса рака молочной железы.

Синонимы английские

IHC (ImmunoHistoChemistry) Test for Breast Cancer Receptor Status (ER, PR, HER2, Ki67), HER2 Overexpression by IHC, Estrogen Receptors, Progesterone Receptors, ER and PR Status, Estrogen and Progesterone Receptor Status.

Метод исследования

Иммуногистохимический метод.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Парафиновый блок с биоптатом образования молочной железы. Ткань первичной опухоли может быть получена с помощью толстоигольной биопсии, а также инцизионных и эксцизионных хирургических вмешательств. Для выявления метастазов на биопсию могут быть взяты ткани из стенки грудной клетки, регионарных лимфоузлов или отдаленных органов.

Общая информация об исследовании

Современные принципы и стратегии лечения рака молочной железы основываются, в том числе, на результатах оценки рецепторного статуса и пролиферативного потенциала опухолевых клеток. Клетки опухоли обладают способностью вырабатывать и располагать на своей поверхности специальные белки – рецепторы, стимуляция которых приводит к запуску клеточного деления и росту опухоли. Подобные рецепторы способны связываться с веществами, присутствующими в организме в норме и исходно никак не связанными с развитием злокачественного новообразования. Согласно актуальным клиническим рекомендациям, для рака молочной железы имеет значение наличие на опухолевых клетках следующих рецепторов, различные комбинации которых называются рецепторным статусом:

    Рецепторы к гормонам – эстрогенам и прогестерону (ER, PR ). Значительная часть опухолей молочной железы является гормонально-зависимыми, то есть их рост поддерживается и стимулируется эстрогенами и прогестероном. Опухоли с положительным гормональным рецепторным статусом хорошо отвечают на терапию аналогами гормонов (тамоксифен), которые блокируют соответствующие рецепторы – связываются с ними, но не вызывают активации внутриклеточных процессов и не дают рецептору впоследствии связаться с гормоном. Таким образом, исследование продукции опухолью ER и PR позволяет определить ее чувствительность к этим препаратам.

    Рецептор второго типа к человеческому эпидермальному фактору роста (human epidermal growth factor receptor 2 – HER2/neu ). В клетках некоторых опухолей молочной железы имеет место повышенная выработка данного рецепторного белка, который, соединяясь с естественным фактором роста, запускает в опухолевой клетке процесс деления. Общее число пациенток с HER2-положительным раком молочной железы составляет от 15% до 20%. Определение HER2/neu имеет не только прогностическое значение (такие опухоли обычно прогрессируют быстрее и имеют более агрессивное клиническое развитие), но и позволяет оценить возможность применения таргетных лекарственных препаратов – моноклональных антител к рецептору HER2 – трастузумаб (герцептин), лапатиниб, пертузумаб. Кроме того, HER2-позитивные опухоли резистентны к тамоксифену.

Пролиферативная активность – показатель способности опухолевых клеток к неограниченному делению, которое является основным фактором биологической агрессивности опухоли. Процесс деления сопровождается появлением в клетке определенных белков, один из которых – Ki-67 . Он не продуцируется в клетках в состоянии покоя, что позволяет использовать его как маркер пролиферативной активности опухоли. Определение уровня Ki-67 имеет важное прогностическое значение, так как наибольшей пролиферативной активностью обладают опухоли из наименее зрелых и дифференцированных клеток.

Все указанные выше маркеры могут быть выявлены при иммуногистохимическом исследовании биоптата или операционного материала опухоли. Для анализа из готового парафинового блока с помощью специального микроножа нарезают тончайшие срезы, которые затем прикрепляют к предметным стеклам и красят рутинными красителями, чтобы было возможно отличить клетки друг от друга и от межклеточного вещества. Затем срезы на стеклах окрашиваются растворами антител, меченных флюоресцирующими метками, специфичных к одному из исследуемых рецепторов. Если в опухолевой клетке присутствует искомый рецептор, антитела связываются с ним и при просмотре стекла под специальным микроскопом можно увидеть флюоресценцию, что будет свидетельствовать о положительном результате теста. Кроме того, при просмотре среза врач-морфолог сможет увидеть, что окрашенный маркер располагается в ядре, клеточном веществе или на оболочке опухолевых клеток. Количество применяемых растворов с антителами соответствует количеству маркеров, которые исследуются в образце. Степень флюоресценции и процент клеток, в которых она есть, лежат в основе интерпретации результатов иммуногистохимического анализа и подробнее описаны в соответствующем разделе.

Для чего используется исследование?

  • Для определения гормонорецепторного статуса и степени пролиферативной активности рака молочной железы для оценки прогноза и индивидуализации лечения, в том числе определения показаний для назначения таргетной терапии.
  • По результатам детекции гормональных рецепторов определяется целесообразность использования антиэстрогенов, а рецептора HER2 – таргетных анти-HER2 препаратов. Выявленное отсутствие этих маркеров позволяет избежать назначения заведомо неэффективной терапии. Высокий индекс пролиферативной активности, а также негативность по рецепторному статусу по большей части являются показанием для добавления к лечению цитостатических препаратов.

Когда назначается исследование?

  • При наличии гистологически верифицированного рака молочной железы - впервые выявленные, рецидивирующие и метастатические опухоли.

Что означают результаты?

При интерпретации результатов иммуногистохимического определения рецепторного статуса стероидных гормонов (эстрогенов и прогестерона) в опухолях молочной железы следует оценивать не только процент окрашенных антителами клеток, но и интенсивность окрашивания. Оба эти параметра учитываются в шкале Allred, где процент позитивных клеток оценивается от 0 до 5 баллов, а интенсивность окрашивания от 0 до 3. Сумма двух показателей является итоговым баллом, по которому определяется позитивность опухоли по рецепторному статусу: 0-2 негативная, 3-8 позитивная. Общий балл 3 по этой шкале соответствует 1-10% окрашенных клеток и является минимальным позитивным результатом, когда назначение гормональной терапии может иметь эффективность.

Иногда рецепторный статус определяется исключительно по проценту клеток с окрашенными ядрами. В таких случаях NCCN рекомендует считать позитивными все опухоли, где есть более 1% позитивных клеток.

При интерпретации окраски на рецептор HER2/ neu учитывают только мембранное окрашивание (окрашивание клеточной оболочки), которое оценивают по шкале от 0 до +3:

    результат 0 и +1 считается HER2-негативным;

    2 – пограничный результат, при нем по данным иммуногистохимического исследования нельзя судить о наличии на поверхности клеток рецептора HER2-neu, необходимо проведение FISH- или CISH-исследования;

    3 – положительный результат – таргетная терапия анти-HER2 препаратами будет эффективна.

Согласно классификации St. Gallen Consensus (2009), низким индексом пролиферативной активности считается уровень Ki-67 менее 15%, средним – 16-30%, а высоким – более 30%.

Что может влиять на результат?

  • Качество предоставленных парафиновых блоков, опыт и квалификация врача-патоморфолога, так как иммуногистохимический метод не в полной мере стандартизирован и оценка его результатов в некоторой степени субъективна.
  • Интерпретация результатов исследования должна проводиться исключительно врачом соответствующей специальности, приведенные данные об эффективности и целесообразности назначения определенных лекарственных средств в зависимости от результатов исследования носят исключительно рекомендательный характер и могут быть пересмотрены с учетом индивидуальных особенностей пациентки.


Важные замечания

  • При неопределенном HER2/neu-рецепторном статусе (результат иммуногистохимического исследования 2+) рекомендуется выполнение FISH- или CISH-исследования, которые позволят выявить гиперактивацию гена, кодирующего этот рецептор. При недоступности этих исследований допускается повторное иммуногистохимическое исследование, но на другом образце опухолевой ткани.
  • Существует несколько шкал оценки рецепторного статуса рака молочной железы, в лабораторном отчете должно быть указано, по какой именно проводилась оценка позитивности опухоли в данном исследовании, а также дана описательная характеристика количества позитивных клеток, особенностей окрашивания клеточных структур и морфологических особенностей клеток.

    Гистологическое исследование биопсийного материала образования молочной железы

    Цитологическое исследование пунктатов молочной железы

    Определение HER2 статуса опухоли методом FISH

    Определение HER2 статуса опухоли методом CISH

Кто назначает исследование?

Онколог, маммолог, онкогинеколог.

Литература

    Dana Carmen Zaha. Significance of immunohistochemistry in breast cancer. World Journal of Clinical Oncology, 2014; 5(3): 382-392.

    NCCN Clinical Practice Guidelines in Oncology: Breast Cancer. Version 3.2017 – November 10, 2017. Available at www.nccn.org.

    Клиническая лабораторная диагностика: национальное руководство: в 2 т. – T. I / Под ред. В. В. Долгова, В. В. Меньшикова. – М.: ГЭОТАР-Медиа, 2012. С. 658-660.

    В. Ф. Семиглазов, Р. М. Палтуев, В. В. Семиглазов, Г. А. Дашян, Т. Ю. Семиглазова, П. В. Криворотько, К. С. Николаев. Общие рекомендации по лечению раннего рака молочной железы St. Galle- 2015, адаптированные экспертами Российского общества онкомаммологов. Опухоли женской репродуктивной системы, 2015; 3: 43-60.

1

Проблема индивидуального прогнозирования течения онкологических заболеваний представляет собой сравнительно новое направление в отечественной онкологии и недостаточно изучена. Индивидуальный план лечения онкологических больных всё ещё нередко составляется на основании личного опыта и интуиции клиницистов, учитывающих лишь несколько факторов, характеризующие основные свойства опухоли.

Разработка системы прогнозирования течения рака молочной железы (РМЖ) затруднена в связи с тем, что прогностическая роль многих факторов, характеризующих биологические особенности опухоли, остаётся предметом дискуссий. Вместе с тем, лишь индивидуальный прогноз может подсказать в каждом конкретном случае наиболее рациональный план лечебных мероприятий.

Индивидуализация лечения больных РМЖ на сегодняшний день должна строиться с учётом факторов прогноза течения заболевания и факторов предсказывающих эффект от лечения.

Прогностические факторы коррелируют с результатами выживаемости и не зависят от лечения, они используются для определения групп больных, требующих дополнительного системного лечения. Предсказательные факторы коррелируют с ответом на лечение независимо от прогноза.

Прогностические и предсказательные факторы условно делятся на две группы. К первой относятся биологические характеристики опухоли (размеры, темпы роста опухоли, гистологическое строение, степень злокачественности, состояние регионарных лимфоузлов, инвазия кровеносных и лимфатических сосудов опухолевыми клетками). Вторая группа прогностических факторов - это молекулярные маркёры опухоли. Они характеризуют биологические особенности опухоли, специфику её «поведения» и регуляции.

Из огромного количества биологически значимых показателей, одними из первых вошедших в практику лечения больных РМЖ были рецепторы эстрогенов (РЭ), рецепторы прогестерона (РП) и амплификация гена HER2/neu.

Наличие РЭ в первичной опухоли молочной железы является показателем её потенциальной чувствительности к лечебным воздействиям, направленным на удаление источников эстрогенов из организма или на противодействие их эффектам. Наличие РП свидетельствует о возможности реакции клетки на прогестероны и определяет её чувствительность к соответствующим препаратам, т.е. может свидетельствовать о функциональной активности РЭ .

В литературе имеются данные, свидетельствующие о том, что гормонозависимые опухоли молочной железы, содержащие оба или хотя бы один из рецепторов стероидных гормонов имеют более благоприятное течение, и послеоперационный прогноз у больных с такими опухолями, независимо от проведённого адъювантного лечения, лучше, чем у больных с рецептор-отрицательными опухолями .

До настоящего времени нет единого мнения о прогностической ценности гиперэкспрессии HER2/neu. По некоторым литературным данным, опухоли с амплифицированным геном HER2/neu слабо реагируют на эндокринную терапию, но чувствительны к химиотерапии. Отдельные авторы отмечают неблагоприятное влияние гиперэкспрессии HER2/neu на безрецидивную выживаемость больных РМЖ, без метастазов в регионарные лимфоузлы, другие не находят достоверной взаимосвязи этих показателей .

Целью данной работы явилось определение прогностического значения экспрессии рецепторов эстрогенов, прогестерона и белка HER2/neu на основе изучения 3-х и 5-летней общей и безрецидивной выживаемости у 130 больных ранними стадиями РМЖ: T1N0M0 (n=77) и T2N0M0 (n=53), получавших лечение в областном онкологическом диспансере г. Астрахани с 2004 по 2008 годы в возрасте от 27 до 68 лет (средний возраст - 49 лет). Использовали прямой метод определения показателей выживаемости . Все больные получали хирургическое лечение. Объём оперативных вмешательств: радикальная резекция молочной железы у 59 больных (45,4%), модифицированная мастэктомия по Мадену у 71 больной (54,6%).

Больные, которым была выполнена радикальная резекция молочной железы в послеоперационном периоде получали дистанционную гамма-терапию на оставшуюся часть молочной железы (СОД= 45-50Гр).

Определение содержания РЭ, РП и статуса HER2/neu осуществляли иммуногистохимическим методом в удалённых опухолях на парафиновых срезах с помощью коммерческого набора (антитела фирмы Dako).

Анализ проведённых исследований показал: положительные РЭ (+) были выявлены в 69 случаях (53,1%), отрицательные (-) - в 61 случае (46,9%). Положительные РП (+) определялись в 63 случаях (48,05%), отрицательные - в 67 случаях (51,55%). У 39 больных (30%) отмечены положительные РЭ (+) и РП (+), у 62 больных (47,7%) отрицательные РЭ (-) и РП (-). В 11 случаях (8,5%) РЭ были положительными (+), а РП - отрицательными (-). Отрицательные РЭ (-) и положительные РП (+) в наших наблюдениях были отмечены у 18 больных (13,8%).

Исследование экспрессии HER2/neu показало, что у 95 больных РМЖ (73,1%) отсутствовала амплификация HER2/neu, у 9 больных (6,9%) была «слабо-положительной» (2+) и в 26 случаях (20%) - положительной (3+). В целом гиперэкспрессия HER2/neu выявлена у 35 больных (26,9%).

Исследования результатов 3-х и 5-летней общей выживаемости больных в зависимости от содержания РЭ и РП показало, что при положительных РЭ (+) и РП (+) 3-х и 5-летняя выживаемость соответственно составила: 100% и 97,3%, при отрицательных РЭ (-) и РП (-) - 69,2% и 65,4%, при положительных РЭ (+) и отрицательных РП (-) - 87,4% и 81,5%, при отрицательных РЭ (-) и положительных РП (+) - 97,3% и 90,4%. Результаты общей выживаемости больных зависели также от уровня экспрессии HER2/neu. Так у HER2/neu-отрицательных больных 3-х и 5-летняя выживаемость составила 98,1% и 96,2%, в группе больных с уровнем экспрессии HER2/neu (2+) эти показатели равнялись 54,3% и 45,1%, а в группе больных с уровнем экспрессии HER2/neu (3+) - 41,2% и 34,3%. Объём выполненного оперативного вмешательства не влиял на результаты выживаемости.

Безрецидивная 3-х и 5-летняя выживаемость у больных с положительными РЭ (+) и РП (+) составила 96,2% и 94,6%, при отрицательных РЭ (-) и РП (-) она равнялась соответственно 60,3% и 58,7%, при положительных РЭ (+) и отрицательном РП (-) эти показатели составили 80,1% и 79,3%, а при отрицательном РЭ (-) и положительных РП (+) - 93,4% и 88,5%.

Безрецидивная 3-х и 5-летняя выживаемость у больных с отсутствием онкобелка HER2/neu составила 94,7% и 92,2%, при уровне экспрессии HER2/neu (2+) и (3+) эти показатели были значительно ниже и соответственно составили 44,3%, 40,2% и 33,1%, 29,4%.

При сочетании отрицательных РЭ (-),
РП (-), HER2/neu (-) показатели 3-х и 5-летней общей и безрецидивной выживаемости соответственно составила: 27,2%, 25,4% и 19,5%, 15,3%.

Таким образом, отсутствие рецепторов стероидных гормонов, а также гиперэкспрессия HER2/neu в злокачественных опухолях молочной железы ухудшают результаты 3-х и 5-летней общей и безрецидивной выживаемости. Статус РП имеет в большей степени влияние на результаты 3-х и 5-летней выживаемости больных ранними стадиями РМЖ. При РП (-) опухолях результаты 3-х и 5-летней выживаемости хуже, чем при РЭ (-) опухолях, а при РП (+) они выше, чем при РЭ (+) опухолях.

Рецепторный статус опухоли и амплификация гена HER2/neu являются независимыми прогностическими факторами у больных первично-операбельным РМЖ и позволяют выявить группы больных требующих дополнительного системного лечения.

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ:

  1. Берёзкин Д.П. Принципы и методы постановки индивидуального прогноза у больных основными формами злокачественных опухолей. - Л.:, 1972. - с. 10-21.
  2. Кушлинский Н.Е., Герштейн Е.С., Талаева Ш.М. Тканевые маркёры рака молочной железы: методические аспекты // Материалы
    II международной ежегодной конференции «Проблемы диагностики и лечения рака молочной железы». - Санкт-Петербург, 2005. - с. 51-53.
  3. Berns P.M.J.J., Klijn J.G.M., Van Staveren I.L. et al. Prevalence of amplification of the oncogenes c-myc, HER2/neu and int-2 in one thousand human breast tumors: correlation with steroid receptors // Europ. J. Cancer. - 1992. - Vol.28. -
    P. 697-700.
  4. Hamilton A., Piccart M. The contribution of molecular markers to the prediction of response in the treatment of breast cancer: a review of the literature on HER-2, p53 and BCL-2 // Ann. Oncol. - 2000. - Vol. 11(6). - P. 647-663.
  5. Kaptain S., Tan L.K., Chen B. Her-2/neu and breast cancer// Diagn. Mol. Pathol. - 2001. - Vol. 10(3). - P. 139-152.
  6. McGuire W.L. Hormone receptors: their role in predicting prognosis and response to endocrine therapy// Semin. Oncol. - 1978. - Vol. 5. -
    P. 428-433.
  7. Nicholson R.I., Gee J.M., Harper M.E. EGFR and cancer prognosis// Europ. J. Cancer. - 2001. - Vol.37 (Suppl. 4). - P. 9-15.

Библиографическая ссылка

Добренькая Е.М., Добренький М.Н. ВЛИЯНИЕ РЕЦЕПТОРНОГО СТАТУСА И АМПЛИФИКАЦИИ HER2/neu НА ПРОГНОЗ У БОЛЬНЫХ ПЕРВИЧНО-ОПЕРАБЕЛЬНЫМ РАКОМ МОЛОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ // Успехи современного естествознания. – 2009. – № 7. – С. 53-540;
URL: http://natural-sciences.ru/ru/article/view?id=12663 (дата обращения: 06.04.2019). Предлагаем вашему вниманию журналы, издающиеся в издательстве «Академия Естествознания»

Рецептор HER 2 - это белковая молекула или так называемый белок HER 2, который необходим для нормального развития клеток. Через рецепторы НЕR 2 организм осуществляет контроль процесса роста, деления, а также самовосстановления здоровых клеток молочной железы. Однако раковые клетки груди имеют повышенное количество рецепторов HER 2, стимуляция которых способствует ускорению роста клеток. В итоге, примерно у 25% пациентов с раком молочной железы клетки после получения ошибочной команды начинают усиленно делиться и бесконтрольно разрастаться.

Негативный и позитивный рак молочной железы HER 2

Рак молочной железы с показателем нормального, не повышенного содержания гена HER2 и рецептора HER2 имеет название HER 2 - негативный. Данный вид рака определяется у 75% пациентов с заболеванием рак молочной железы.
Рак молочной железы с показателем повышенного содержания (амплификацией) гена HER 2 или ускоренной выработкой (оверэкспрессией) рецептора HER2 имеет название HER 2-позитивный. Он признан особо агрессивным. Его диагностируют только в 25% случаях рака молочной железы. Рост HER 2-позитивных злокачественных опухолей намного быстрее, чем HER 2-негативных. Однако, HER 2 -позитивный рак молочной железы поддается лечению специальными препаратами Герцептин и Лапатиниб, которые не имеют эффекта при лечении HER2-негативного рака.
Кроме того, стоит помнить, что в 30% случаев HER 2-позитивный рак молочной железы со временем превращается в HER2 -негативный.

Герцептин и ранний рак груди

Проведенное исследование доказало эффективность Герцептина для снижения риска рецидива заболевания у женщин с ранним раком груди. Не так давно для предотвращения рецидива применялась химическая терапия и гормональная терапия, однако не всегда успешно. После того, как вместе с химической терапией стали применять Герцептин, риск возникновения рецидива сократился вдвое.
Лицензирование Герцептина состоялось в 2006 году в Великобритании. Данный препарат зарекомендовал себя как возможный вариант лечения после проведения хирургического вмешательства и дополнительно химио-радиотерапии.

HER 2 и гормональная терапия

Применение гормонотерапии способствует замедлению или блокировке роста злокачественных клеток молочной железы. Эффект гормональной терапии достигается за счет изменения уровня женских гормонов, производимых собственным организмом, и предотвращения уничтожения гормонов злокачественными клетками опухоли.
Гормональная терапия применима в тех случаях, когда у раковых клеток присутствуют эстроген- или прогестерон-позитивные рецепторы. Кроме того, для определения эффективности гормонотерапии необходимо определить статус HER 2, показатель которого также является значимым при выборе метода лечения.

Определение HER 2 статуса

Для определения HER2 статуса рака молочной железы, а именно для выявления повышенного уровня гена HER 2 в опухолевых клетках применяются специальные тесты из ткани опухоли, взятого при биопсии. Тесты могут проводиться и одновременно с начальным этапом хирургического вмешательства.
Варианты тестов:
1. Иммуногистохимическое исследование (ИГХ) является недорогим, но и сравнительно точным методом определения HER 2 статуса. Данное исследование позволяет по гистологическому материалу определить показатель HER 2 протеина в опухолевых клетках молочной железы с использованием специальной окраски. Чем выше показатель количества HER2 рецепторов, тем ярче окраска. Результат зависит от показателя интенсивности окраски и полноты окрашивания клеточной мембраны и определяется по шкале от 0 до 3+. Окрашивание, полностью окружающее контур клеточной мембраны, определяется как 2+ или 3+. Частичное, неполное - как 1+. При показателе 0 амплификация (накопление) гена HER 2 отсутствует. При показателях 1+ и 2+, рекомендовано FISH-исследование для уточнения HER2 статуса.
2. тест FISH (флуоресцентная гибридизация) FISH - наиболее точное исследование для выявления повышенного уровня гена HER 2 в опухолевых клетках молочной железы.
Показатели FISH теста разделяют рак молочной железы на:
HER2 - позитивный рак (при наличии амплификации гена HER2);
HER2 - негативный (при отсутствии амплификации гена HER2).
3. тест SPOT-LIGHT HER 2 CISH
Тест под названием SPoT-Light HER2 CISH также выявляет повышенное содержание (амплификацию) гена HER2 в опухолевых клетках молочной железы. Тест введен в практику с 2008 года и используется до настоящего времени.
Показатели проведенного SPoT-Light HER 2 CISH теста делятся на:
HER2 - позитивный рак молочной железы (при наличии амплификации гена HER2)
HER2 - негативный рак молочной железы (при отсутствии амплификации гена HER2)
4. тест INFORM HER 2 DUAL ISH
Новейший тест Inform HER2 Dual ISH, одобренный в США, используется с июня 2011 года.
Показатели результатов теста SPoT-Light HER2 Inform HER2 Dual ISH аналогичны вышеуказанным тестам и также подразделяются на позитивный и негативный рак молочной железы.